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技术资料/正文
13 人阅读发布时间:2026-01-28 11:19
本应用指南介绍了如何在种子培养放大过程中使用细 胞灌流培养的方法来节省工艺时间、简化操作并最大 程度地提高设备利用率。为了建立高密度细胞库,使 用 ReadyToProcess WAVE™ 25 波浪生物反应器以灌流培 养方式将中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞进行高密度灌流培 养。在细胞密度达到 50×106 /ml 后,以 1:1 的比例添加 冻存培养基来终止培养。整个培养过程是在 Cellbag™ 灌流生物反应器中进行的,可以直接使用集成了细胞 截留膜的灌流培养袋将细胞浓缩至 50×106 /ml,无需单 独的离心步骤。将细胞悬液分成 4.5mL 的等分试样,并 进行冷冻,然后保存在液氮中。从建立好的高密度细 胞库中取出一支种子管解冻,接种到含有 1L 培养基的 ReadyToProcess WAVE 25 生物反应器中。培养体积逐渐 增加至 10 L,然后启动灌流模式,直到细胞密度达到每 毫升 50×106 个活细胞。采用上述工艺方法,仅需 10 天, 就能生产出足以接种 2000L 生物反应器的细胞量。在种 子培养扩增阶段,采用灌流法可实现从冻存管到 N-1 生 物反应器的一步式扩增,而无需生物反应器的逐级扩增 步骤和相关的人工操作。